/ Каталог / Проточная цитометрия / Реагенты для проточной цитометрии / Диагностические наборы для проточной цитометрии
DAKO QIFIKIT for Flow Cytometry / Набор QIFIKIT для количественного определения антигенов на клеточной поверхности Набор QIFIKIT предназначен для количественного определения антигенов на клеточной поверхности методом проточной цитометрии с использованием непрямого иммунофлуоресцентного анализа.
Набор QIFIKIT состоит из 6 популяций микросфер диаметром ~10мкм, несущих на поверхности различные, четко определенные количества мышиных моноклональных антител (Mab). Число молекул Mab на 6 популяциях микросфер определено в диапазоне от 0 до 400000-800000. Точные значения указаны в инструкции к набору. Микросферы, имитирующие клетки, помечены специфическими первичными мышиными моноклональными антителами.
Краткое описание процедуры количественного определения.
Клетки образца метятся первичными мышиными Mab в достаточной концентрации. В этих условиях первичные Mab моновалентно связываются с антигенами на клеточной поверхности. Далее, число связанных молекул антител соответствует количеству сайтов антигенов.
Затем клетки инкубируются:
- с микросферами QIFIKIT;
- с поликлональными козьими анти-мышиными антителами к иммуноглобулинам, меченными FITC (Goat F(ab`)2, Кат.№ F0479) в достаточных концентрациях.
Калибровочная кривая строится как зависимость интенсивности флуоресценции определенной популяции микросфер от количества молекул Mab на микросферах. Количество антигенных сайтов на клетках образца определяется интерполяцией.
В состав набора входят также два «коктейля» микросфер: "Set-Up Cocktail" - микросферы для настройки и "Calibration Cocktail" -микросферы для калибровки, по 1 мл, этого количества достаточно для 10 калибровок. В набор входят также поликлональные козьи анти-мышиные антитела к иммуноглобулинам, меченные FITC (Goat F(ab`)2, Кат.№ F0479), 200 мл.
Набор экономичен в использовании, так как различные клетки образцов могут быть помечены различными первичными антителами, при этом количественное определение можно производить одним и тем же типом калибровочных микросфер.
Важный момент - образцы и микросферы должны инкубироваться с конъюгирующими агентами одновременно.
Литература:
- Poncelet P, Carayon P. Cytofluorometric quantification of cell-surface antigens by indirect immunofluorescence using monoclonal antibodies. J Immunol Methods 1985;85:65-74.
- Poncelet P, Lavabre-Bertrand T, Carayon P. Quantitative phenotypes of B chronic lymphocytic leukemia B cells established with monoclonal antibodies from the B cell protocol. In: Reinherz EL et al., eds. Leukocyte Typing II. New York-Berlin-Heidelberg-Tokyo: Springer-Verlag, 1986;2:329-43.
Информация для заказа:Область использования: | Производство: | Dako | Метод: | Проточная цитометрия | Объем: | 10 calibrations | Кат. номер: | K007811 | Цена (с НДС 10%): | | В корзину | Наименование: DAKO QIFIKIT for Flow Cytometry / Набор QIFIKIT для количественного определения антигенов на клеточной поверхности . Примечание: Готовые диагностические наборы для проточной цитометрии дополнительная информация (на английском языке). |
|